1. Barvení preparátu

Při barvení preparátu vitálními barvivy použité činidlo kápneme k okraji položeného krycího sklíčka a z druhé strany odsáváme vodu. 

Tím dojde k šetrnému prosátí barviva a následnému vybarvení sledovaných látek a struktur v preparátu.


Přehled používaných činidel a reakcí



Projasňování preparátu se provádí při sledování obsahu silnějších nebo lignifikovaných objektů. 

Pomocí projasňovacího média se upraví index lomu buněčných komponent a okolního média. 

Buněčný obsah zůstává zachován a je možné pozorovat, při různém zaostření, strukturu objektu v tzv. optických řezech. Materiál tedy není nutno řezat. 




Příprava mikroskopického skla 

Podložní skla: 

rozměr – nejčastěji 76 x 26 mm 

tloušťka - 0,5 až 1,5 mm 

(některé objektivy s korekcí na tloušťku podložního skla) 


Používat ne příliš stará podložní skla, čistá, odmaštěná 


Krycí sklíčka: 

různé rozměry (16x16 mm, 18x18, 20x20, 22x22, 24x24) 

tloušťka 0,17 mm 


označení číslicí 

0 = 0,13 až 0,14 mm 

1 = 0,16 až 0,18 

2 = 0,19 až 0,20 


BARVENÍ

Látka (barvivo)  - slouží v biologii k prokázání výskytu (kvalifikaci) nebo množství (kvantifikaci) specifické látky ve zkoumané tkáni nebo v pletivu,  nebo k obarvení celých struktur a objektů. 

Jednotlivé buněčné struktury nejsou v mikroskopu při pozorování bez předchozího zbarvení téměř rozlišitelné.







Přirozená barviva:

karmín - extrakt ze samiček červce nopálového (Coccus cacti)

Po usušení se červci uvaří 

 barvivo se vysráží síranem hlinitoamonným.

- bazické barvivo




Přirozená barviva:

orcein - extrakt z některých lišejníků

 skládá ze 14 látek

tmavě modrá látka

pH indikátor - v kyselém prostředí má červenou barvu, 

v neutrálním tmavě modrou až fialovou 

v zásaditém modrou (lakmus).




šafrán - extrakt z blizen šafránu (Crocus sativus)

- velmi silné žluté barvivo

             - kyselé barvivo - na kolagen





Umělá barviva: